ИССЛЕДОВАНИЕ МАРКЕРОВ ОКСИДАТИВНОГО СТРЕССА У БОЛЬНЫХ СКЛЕРОТИЧЕСКИМ И АТРОФИЧЕСКИМ ЛИХЕНОМ ВУЛЬВЫ
Чернова Н.И., Проскурина М.И., Жукова О.В. и др. Исследование маркеров оксидативного стресса у больных склеротическим и атрофическим лихеном вульвы. Фармакология & Фармакотерапия. 2025; 3: 30–33. DOI 10.46393/27132129_2025_3_30–33
В последнее десятилетие этиология и патогенетические механизмы склеротического и атрофического лихена вульвы (САЛВ) являются предметом активного изучения. Оксидативный (окислительный) стресс все чаще рассматривается в качестве одного из возможных механизмов, лежащих в основе развития дерматоза. Цель исследования: изучение биомаркеров оксидативного стресса в сыворотке крови пациенток с САЛВ. Материал и методы. В исследовании участвовали две группы женщин: 40 пациенток с диагнозом САЛВ в возрасте от 21 до 76 лет и 26 женщин без данного заболевания, составивших контрольную группу. У пациенток обеих групп оценивали сывороточные уровни маркеров оксидативного стресса: PerOx (определение перекисей), тиолового статуса, AOPP (продуктов окисления белков). Результаты. У пациенток с САЛВ наблюдались нарушения в уровнях биомаркеров окислительного стресса. Количе- ственная оценка PerOx и AOPP показала статистически значимое повышение по сравнению с контрольной группой (p < 0,001 для обоих показателей), что свидетельствовало о наличии оксидативного стресса. Многофакторная регресси- онная модель, скорректированная на наличие сопутствующей соматической патологии, продемонстрировала, что толь- ко показатель AOPP является независимым предиктором оксидативного стресса при САЛВ (отношение шансов 1,88; 95% доверительный интервал 1,37–2,96; p = 0,001). Заключение. Данные, полученные в ходе исследования, подтверждают наличие окислительного стресса у пациенток, страдающих САЛВ. Результаты указывают на то, что AOPP может быть перспективным биомаркером для диагностики и мониторинга САЛВ, а также потенциальной терапевтической мишенью для антиоксидантного лечения. Склеротический и атрофический лихен вульвы (САЛВ) – это хроническое рецидивирующее заболе- вание кожи вульвы, характеризующееся воспалени- ем, зудом, потерей эластичности и прогрессирующим истончением кожи в пораженной области [1]. На про- тяжении последнего десятилетия наблюдается устой- чивая тенденция к увеличению распространенности дерматозов среди женской популяции как в репродук- тивном, так и в менопаузальном и постменопаузальном периодах [2, 3]. Несмотря на проводимые исследования, этиология и патогенез заболевания остаются предметом изучения. На данный момент предполагается, что в раз- витии дерматоза важную роль играют иммунная дис- регуляция с последующим хроническим воспалением и нарушения метаболизма коллагена [4, 5]. Среди ги- потез также рассматриваются аутоиммунный меха- низм, роль гормонального дисбаланса и генетическая предрасположенность [4]. Часто выявляют ассоциацию САЛВ с другими аутоиммунными заболеваниями, та- кими как патологии щитовидной железы, очаговая ало- пеция, витилиго, сахарный диабет, пернициозная ане- мия и рубцующаяся пемфигоидная пузырчатка [6]. В научных исследованиях последних лет предпо- лагается, что важным патогенетическим звеном в раз- витии САЛВ может быть оксидативный стресс (ОС). Считается, что активные формы кислорода (АФК) вза- имодействуют с апоптотическими макромолекулами в результате повреждения дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), а окислительное повреждение ДНК может способствовать прогрессированию склероза, аутоиммунного процесса и канцерогенезу при САЛВ. Наличие выраженного воспаления может еще больше ускорить прогрессирование дерматоза за счет продук- ции большего количества АФК [7]. C.S. Sander и соавт. (2004) обнаружили, что в пораженных склероатрофи- ческим лихеном (САЛ) тканях присутствуют [8]: • продукты перекисного окисления липидов в высокой концентрации в кератиноцитах ба- зальных слоев эпидермиса; окислительное повреждение ДНК во всех слоях, пораженных САЛ; • окислительное повреждение белков в зонах склероза дермы; • низкие концентрации антиоксидантного фер- мента супероксиддисмутазы (СОД) марганца, который является частью эндогенной системы антиоксидантной защиты. G.T. Li и cоавт. (2014) продемонстрировали на- личие ОС у пациентов с САЛ: они выявили значитель- но высокие уровни малонового диальдегида (маркер перекисного окисления липидов), связанные с низки- ми уровнями эндогенного антиоксиданта СОД [9]. Несмотря на достижения в изучении этиопато- генеза заболевания, существующие схемы базисной терапии САЛВ, включающие применение ультрапо- тентных или среднепотентных топических глюкокор- тикостероидов (тГКС), имеют ряд побочных эффектов в виде риска присоединения и активации вторичной инфекции, развития атрофии, синдрома «рикоше- та», а также не обеспечивают длительной ремиссии заболевания. В этом контексте подтверждение роли ОС в патогенезе САЛВ позволило бы рассматривать применение антиоксидантных препаратов в качестве дополнительного лечения САЛ, которое способствует предотвращению патологических изменений на кле- точном уровне, оказывает противовоспалительный эффект, снижает частоту применения тГКС и обеспе- чивает более длительную ремиссию заболевания. Современные исследователи, изучающие ОС у пациентов с САЛВ, акцентируют внимание не толь- ко на антиоксидантной защите, но и на механизмах пе- рекисного окисления (PerOx) [10]. Однако известно, что свободные радикалы также оказывают повреждающее действие на белки. AOPP (advanced oxidation protein product – продукты окисления белков) высту- пают в роли одного из индикаторов окислительного повреждения белков. В настоящее время существует значительное количество научных работ, демонстри- рующих, что AOPP служит маркером ОС при различ- ных патологических состояниях [11, 12]. Определение уровня тиолов белков сыворотки (тиоловый статус) является прямым измерением in vivo окислитель- но-восстановительного статуса, так как тиолы легко вступают в реакцию с кислородсодержащими сво- бодными радикалами с образованием дисульфидов, что также отражает потенциальную возможность по- вреждений ДНК клетки. В научной литературе отсут- ствуют исследования, посвященные оценке тиолово- го статуса и AOPP у пациентов с САЛВ. Цель исследования – изучение биомаркеров ОС в сыворотке крови пациенток с САЛВ. Материал и методы В исследовании приняли участие 40 женщин в возрасте от 21 до 76 лет с диагнозом «склеротиче- ский и атрофический лишай аногенитальной обла- сти» и 26 женщин без САЛВ, сопоставимые по воз- расту, обратившиеся на дерматовенерологический прием в филиал «Юго-Западный» Московского науч- но-практического центра дерматовенерологии и кос- метологии. Для изучения выраженности ОС при САЛВ проанализированы сывороточные уровни следу- ющих биомаркеров: PerOx (определение переки- сей), тиоловый статус, продукты окисления белков (AOPP). Определение биомаркеров ОС проводили мето- дом иммуноферментного анализа с использованием реактивов: 1) PerOx – «KC5100.RF PerOx (определение пере- кисей)» (Immundiagnostik, Германия), рефе- ренсные значения: менее 180 мкмоль/л – низ- кий ОС, от 180 до 310 мкмоль/л – средний ОС, более 310 мкмоль/л – высокий ОС; 2) тиоловый статус – «K1800.RF Тиоловый статус» (Immundiagnostik, Германия), референсные зна- чения: 430–660 мкмоль/л; 3) продукты окисления белков – «K7811w.RF Продукты окисления белков (AOPP)» (Immundiagnostik, Германия), референсные зна- чения: < 60 мкмоль/л. В рамках описательной статистики количественные признаки были охарактеризованы средним (Mean), стандартным отклонением (SD), медианой (Median), а также квартилями 1 и 3 (Q1 и Q3). Срав- нение между группами проводили с помощью теста Манна–Уитни–Уилкоксона. Для многофакторного анализа использовали логистическую регрессию, в которой значения биомаркеров являлись независи- мыми переменными, в то время как принадлежность к группе – зависимой. Различия между группами счи- тали достоверно значимыми при p < 0,001. Расчеты выполняли с помощью языка программирования R версии 4.4 и дополнительных пакетов dplyr, ggplot2, gtsummary. Результаты У 40 пациенток группы исследования с гисто- логически подтвержденным диагнозом САЛВ продол- жительность заболевания составила 3,86 ± 2,1 года. Преобладающее число женщин были в возрас- те 46–55 лет (12/30%) и старше 56 лет (14/35%), то есть находились в перименопаузальном и постменопаузальном периодах соответственно, что со- гласуется с данными литературы о высокой частоте встречаемости дерматоза среди пациенток данной возрастной группы. В репродуктивном возрасте САЛВ был зафиксирован у трети (14/35%) участниц исследования, что также коррелирует с возрастающей частотой заболевания у женщин репродуктив- ного периода. Средний возраст пациенток группы исследования составил 51,4 ± 8,25 года и статистиче- ски не отличался от возраста пациенток контрольной группы – 49,6 ± 7,34 года. Для оценки наличия ОС у пациенток с САЛВ и достоверности различий с группой женщин без дан- ного дерматоза был проведен статистический анализ, результаты которого представлены в табл. 1. Оценка уровня биомаркеров ОС у пациен- ток с САЛВ показала наличие отклонений от ре- ференсных значений и статистически достовер- ные различия уровня биомаркеров ОС у пациенток с САЛВ по отношению к группе контроля для PerOx (p < 0,001) и AOPP (p < 0,001). Так, в группе исследо- вания уровни PerOx соответствовали высокому ОС по сравнению с низким уровнем в группе контроля, что демонстрирует существенное превышение об- разования свободных радикалов над их нейтрали- зацией у больных с САЛВ. Значения AOPP, который является чувствительным индикатором свободно- радикальной патологии в целом, свидетельствовали о воспалительно-патологических процессах в орга- низме на фоне дерматоза. Так как при ряде соматических патологий мо- гут происходить изменения окислительно-восстано- вительных реакций и сопутствующая соматическая патология при САЛВ может являться конфаундером (переменной, влияющей на достоверность резуль- татов), влияющим на уровень ОС, были проведены оценка частоты встречаемости сопутствующей пато- логии в каждой группе и многофакторный анализ, где соматические заболевания были добавлены в модель в качестве поправочной ковариаты (табл. 2, 3). Среди сопутствующих соматических патологий наиболее часто встречаемым состоянием при САЛВ, значимо отличающимся по частоте от группы контро- ля, являлась патология щитовидной железы (20/50%) (p = 0,22), что согласуется с данными литературы [4]. Без достоверно значимых различий как в группе ис- следования, так и в группе контроля регистрирова- лись кожные заболевания (псориаз/экзема, склеро- дермия), анемия, заболевания желудочно-кишечного тракта, метаболический синдром и онкологические состояния. Результаты многофакторного анализа с поправ- кой на сопутствующую соматическую патологию по- казали, что статистически значимым маркером ОС при САЛВ является только показатель AOPP (отно- шение шансов 1,88; 95% доверительный интервал 1,37–2,96; p = 0,001), который можно использовать в качестве лабораторного биомаркера для определе- ния нарушений окислительно-восстановительных процессов у больных САЛВ. Заключение Полученные в ходе исследования данные про- демонстрировали наличие ОС у пациенток с САЛВ. Чувствительными сывороточными биомаркерами оказались не только продукты перекисного окисления (PerOx), которые были представлены в ранних иссле- дованиях у пациенток данной группы, но и продукты глубокого окисления белков (AOPP), являющиеся био- химическими маркерами воспалительных и патологи- ческих процессов свободнорадикального характера. Результаты исследования позволяют предположить, что данный показатель может быть полезным биомар- кером у больных САЛВ и потенциальной мишенью ан- тиоксидантной терапии. Литература 1. Kirtschig G., Becker K., Günthert A. et al. Evidence-based (S3) guideline on (anogenital) lichen sclerosus. J. Eur. Acad. Dermatol. Venereol. 2015; 29 (10): e1–43. 2. Аполихина И.А., Соколова А.В., Мусаева А.К., Зайцев Н.В. Малоинвазивная диагностика заболеваний вульвы с использованием панч-биопсии. Акушерство и гинекология. 2020; 8: 141–148. 3. Van der Meijden W.I., Boffa M.J., Ter Harmsel B. et al. 2021 European guideline for the management of vulval conditions. J. Eur. Acad. Dermatol. Venereol. 2022; 36 (7): 952–972. 4. Tran D.A., Tan X., Macri C.J. et al. Lichen sclerosus: an autoimmunopathogenic and genomic enigma with emerging genetic and immune targets. Int. J. Biol. Sci. 2019; 15: 1429–1439. 5. Virgili A., Borghi A., Cazzaniga S. et al. New insights into potential risk factors and associations in genital lichen sclerosus: data from a multicentre Italian study on 729 consecutive cases. J. Eur. Acad. Dermatol. Venereol. 2016; 31: 699–704. 6. Gulin S.J., Lundin F., Seifert O. Comorbidity in patients with lichen sclerosus: a retrospective cohort study. Eur. J. Med. Res. 2023; 28 (1): 338. 7. Paulis G., Berardesca E. Lichen sclerosus: the role of oxidative stress in the pathogenesis of the disease and its possible transformation into carcinoma. Res. Rep. Urol. 2019; 11: 223–232. 8. Sander C.S., Ali I., Dean D. et al. Oxidative stress is implicated in the pathogenesis of lichen sclerosus. Br. J. Dermatol. 2004; 151 (3): 627–635. 9. Li G.T., Guo S.Z., Liu Y.J., Yang B. Alteration of T-cell subpopulations and lipid peroxidation in the blood of patients with vulvar non-neoplastic epithelial disorder. Clin. Exp. Obstet. Gynecol. 2014; 41 (2): 174–176. 10. Киселева Е. А., Махмутходжаев А.Ш., Михеенко Г.А. Окислительный стресс у пациенток с краурозом вульвы. Мать и дитя в Кузбассе. 2022; 3 (90): 78–82. 11. Baskol G., Demir H., Baskol M. et al. Investigation of protein oxidation and lipid peroxidation in patients with rheumatoid arthritis. Cell Biochem. Funct. 2006; 24 (4): 307–311. 12. Moraes J.B., Maes M., Roomruangwong C. et al. In major affective disorders, early life trauma predict increased nitro-oxidative stress, lipid peroxidation and protein oxidation and recurrence of major affective disorders, suicidal behaviors and a lowered quality of life. Metab. Brain Dis. 2018; 33 (4): 1081–1096.